cq值目的比内参小,qpcr组间内参差异大

cofilin内参 2023-10-12 13:14 218 墨鱼

cofilin内参

cq值目的比内参小,qpcr组间内参差异大

Step1:ΔCq值=目的基因Cq–内参基因Cq Step2:ΔΔCq值=处理样品ΔCq–对照样品ΔCq Step3:最后计算出倍数关系：2-ΔΔCq值3、相对表达量结果：Azure Cielo™实时荧光定量PCR 来自RQ:相对量值RQ Min:相对量值最小值RQ Max:相对量值最大值CT:阈值线与扩增曲线的交点所对应的循环圈数CT mean:CT值的平均值CT SD:CT值的标准偏差△CT:某

1、基本概念：Threshold cycle (Ct) 阈值循环数也写作Cq值，在阈值线法下，荧光信号与阈值线交叉时的循环数为Ct。为了消除偶然误差，仪器软件通常将第3-15个循环的荧光值设为基线(baselCt值与起始模板量的关系：模板的Ct值与该模板的起始拷贝数的对数存在线性关系。起始模板量浓度越高，Ct值越小；起始模板量浓度越低，Ct值越大。2.扩增曲线、荧光阈值与一定产物量qPCR扩增产物量是以

∩＾∩ 我的复孔还行，做的3个复孔，基本上都是一致的，cq差异0.2之内(我是把除了cDNA以外的其他的水引物都先混好，然后加每个孔，加完再加cDNA)。但是，内参不齐，同一个样本内做的三复孔，差异小1. 实验目的：比较未处理（对照组）和经处理后（处理组）的样本中某基因的表达变化。2. 实验分组与排

?﹏? 结果如楼主所言，目的基因比内参循环数还小；第二次15倍稀释，结果内参cq值13,14；目的基因cq值23，内参基因Ct值正常，说明试剂及操作步骤无误。目的基因Ct值出现较晚，可能原因为：① 目的基因表达量偏低--重新富集RNA ② 目的基因引物扩增效率低：将模板进行梯度稀释，以确定引物的

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