熔解曲线,熔解曲线原理

探针熔解曲线法原理 2023-06-05 12:45 536 墨鱼

探针熔解曲线法原理

熔解曲线,熔解曲线原理

熔解曲线技术利用不同的双链DNA具有不同的解链温度(Tm) ,通过染料或者探针监测熔解曲线形态变化，从而快速准确地进行基因分型和微生物鉴定。近年来熔解曲线技术，不仅可以区分Tm 高分辨率熔解曲线分析技术(High Resolution Melting ),简称HRM ,是近年来兴起的一种检测基因突变、进行基因分型和SNP 检测的新方法。基本原理是基于核酸分子由于片段长短、

˙▽˙ 1.PCR熔解曲线分析法是做realtime-pcr时分析，用来确定不同的反应产物，包括非特异性产物的分析方法.原理是在扩增反应完成后，通过逐渐增加温度的同时监测每一步的荧光信号来产熔解曲线——实现2 RFU为荧光单位，随着温度的升高，荧光值一直在下降，表明DNA双链在变性成为单链，但是下降速率却是不一样的，如绿色的线大概在85°后下降变快，蓝色和红色的线却在85°

熔解曲线可以检验扩增反应的特异性，因此是染料法qPCR实验的必需步骤(非常重要！!)借助熔解曲线，我们可以检查qPCR反应体系是否存在非特异性扩增、引物二聚体或气溶胶污染等。小红如下图所示，基因1 qPCR产物长度较基因2 qPCR产物短，那融解曲线表现出基因1的Tm值低于基因2的Tm值。同理，如果qPCR扩增体系不特异，出现一个非特异性扩增产物，那qPCR产物即由目的产

后台-插件-广告管理-内容页尾部广告（手机）

标签：熔解曲线原理