pcr曲线锯齿状,荧光定量PCR标准曲线图

pcr复孔之间差距大 2023-09-25 12:01 997 墨鱼

pcr复孔之间差距大

pcr曲线锯齿状,荧光定量PCR标准曲线图

扩增曲线，是描述PCR动态进程的曲线即扩增曲线PCR的扩增曲线实际上并不是一条标准的指数曲线，而是S形曲线。这是因为随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶的失活、dNTP和引物的枯竭、反应副以下是笔者在值班时做新冠核酸检测遇到的两例内标扩增曲线异常的病例，具体报告如下。案例经过近日笔者夜班遇到一例异常的PCR扩增反应曲线——内标扩增反应曲线呈锯齿状，让人联想

ˋ△ˊ 1、荧光值不高，比如没有起峰时纵坐标间距较小，一点点的波动就能反应出来，当起峰后，纵坐标比例显示的范围变大，所以会将本地压平。如果你荧光值不高时会出现锯定量PCR的扩增曲线的平台期为什么是锯齿状1、反应体系随着PCR的进行，造成阻碍物增多，到平台期时达到最高水平，影响机器的正常检出；需要优化反应体系各个离子的

1、扩增曲线形状异常a、扩增曲线不光滑：信号太弱，经系统矫正后产生。提高模板浓度重复实验。、扩增曲线断裂或下滑：模板浓度较高，基线的终点值大于Ct值。减小基线终点(C1.引物或者模板上机跑荧光定量之前先跑个普通pcr，然后跑胶看有没有表达。如果是单一条带那就没问题

＋ω＋ (4)扩增曲线呈锯齿状且不连续(图片来源于：丁香实验平台) 曲线杂乱，这是典型的ROX 添加不当导致的异常结果。小伙伴们可以尝试去掉ROX 分析数据，检查下重复性是否良好(即复孔间(3)个别扩增曲线骤降这是比较常见的一个问题，反应管内若留有气泡，温度升高后会导致气泡破裂，使仪器检测到的荧光值突然降低。所以小伙伴们在进行扩增反应之前，

＋ω＋异常的扩增曲线1. 扩增曲线抖三抖，呈锯齿状不平滑原因分析实验操作问题：PCR反应管没有盖紧，反应液泄露；PCR反应液有挂壁模板问题：RNA纯度低，扩增信号太弱锯齿型异常扩增曲线曲线特点：所有通道的扩增曲线出现锯齿状。原因分析：扩增仪电压不稳、采光或者滤光片故障。解决方案：检查扩增仪电压和光路系统，及时排除

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标签：荧光定量PCR标准曲线图