模板3倍ct值,PCR结果出现的Cq值与CT值

模板3倍ct值,PCR结果出现的Cq值与CT值

ˋωˊ 即便是同类医疗单位、同种机型、相似工作条件，工作量的差异也达3倍以上3、国内PET-CT技术发展的几个特点(1)地区：目前PET-CT工作状态好的地区，除北京、江苏、上海和广东等传统经济目前临床上应用最广的融合基因多检测方法为荧光pcr法，其主要优点有(1)闭管操作、封闭状态检测，减少了模板污染和假阳性的可能；2)无需对pcr产物进行后处理，操

3’CTCAGNNNNN-5’SEQ ID NO.2)。构建步骤如下：1.1以pAAV[Exp]-EFS>EGFP-SV40pA为模板，设计扩增引物如下：AflIII-F: 5’GCCTTTTGCTGGCCTTTTGCTC-3’SEQ A.模板DNA量越多，荧光达到阈值的循环数越少，即Ct值越小。B.模板DNA量越多，荧光达到阈值的循环数越少，即Ct值越大。C.模板DNA量越少，荧光达到阈值的循环数越少，即Ct值越小D.模

3、Ct值与模板拷贝数的关系理想情况下，qPCR的模板经过一定的循环数进行指数扩增，扩增循环数和产物量之间的关系是：扩增产物量Cn=起始模板量C1×(1+扩增效率E)^循环数n。但是由于E通Ct值与模板拷贝数的关系PART04 关于qPCR中Ct值的几点思考PARTONE CT值的基本概念PARTONECT值的基本概念阈值循环数Thresholdcycle(Ct)也写作Cq值，荧光信号大于荧光阈值时PCR循环数。仪器软件

一般情况下，多次梯度稀释，模版稀释10倍，Ct值大约相差3.3。如果是稀释2倍，那么Ct值本身相差就很小，大约相差1。当做标准曲线的时候，模板应该是10倍梯度稀释，我的模板，没稀释时扩增的Ct值约在22~23左右，稀释3倍后，Ct值直接后延了约5个循环，将近28了！！！

解决方法：如果融解曲线没有杂峰，无模板阴性对照同目的基因的CT值为3 or 5 以上，那CT值为准确的，可多设置几个复孔，选择重复性好的CT值参与计算。2)CT<30,重反了，初始模板越少，ct值越大，ΔRn代表pcr产物的量，一定范围初始模板量越少，ΔRn越小