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qpcr阴性对照会有ct值吗 |
做qpcr内参ct值23正常吗,正常内参基因ct值范围
╯▽╰ 内参值在14-18之间,目的值在22-26之间最理想本人近期做qPCR实验,但是结果发现GAPDH的Ct值在25左右,目的基因的Ct值在32左右,这样的结果是不是进行下一步的分析不可信?在细胞中做的一般看家基因的Ct值在18左右。各位有遇到过类
ˇ△ˇ 我最终的原因有点狗血师姐替我做了一次也得到相同的ct不正常值。我们现在怀疑它不是鼠源细胞,但因此,30和35之间差的是32倍而非5倍,35和40间亦如此。一般比较确信的阳性值一般都是ct<30。
剑藏鞘发布于2018-04-20 08:28IP上海跑个RNA电泳看看RNA的质量回复点赞收藏查看对话(1)更多主要做方差分析或t检验如何对qPCR数据进行统计分析如果避免了预扩增,数据可转换成绝对的cDNA数量,否则数据分析可以Cq值来开展,因为每个细胞的转录本水平呈对数正态分布。一开始,
ct值挺稳定的,在31左右,应该不是质控的问题,就是高低变化大。木头羽4-13 我跑的扩增曲线,溶解曲线都挺好的。目的基因1的Ct值在15~17,内参在22-25左右目的在qPCR(定量PCR) 反应时,cDNA 和gDNA 可能会被同时扩增,定量仪器无法区分荧光信号是来自cDNA 还是gDNA,因此结果可能会存在偏差。特别是低表达量的基因,本身的扩增信号低,CT 值
≡(▔﹏▔)≡ 理论上,假设初始模板量为1个拷贝,酶的扩增效率100%,到达最大阈值约需要35个循环,因此业内通常认为qPCR的有效线性范围为Ct:15-35。通常酶的扩增效率无法达到100%,达到1个拷贝模板的起始模板量浓度越高,Ct值越小;起始模板量浓度越低,Ct值越大。2.扩增曲线、荧光阈值与一定产物量qPCR扩增产物量是以荧光信号的形式直接呈现,也就是扩增曲线。在PCR早期,扩
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