PCR的扩增曲线的意义及解读,pcr异常曲线分析

PCR的扩增曲线的意义及解读,pcr异常曲线分析

ゃōゃ 扩增曲线可以粗略地判断扩增效率。SYBR Green的双delta Ct法要求目的基因和内参的扩增效率基本一致。如果不荧光定量PCR是通过检测并记录反应体系中荧光信号的变化来实时监测整个PCR进程，这就不得不来说一说荧光定量PCR中的三大曲线：扩增曲线、熔解曲线、标准曲线。首

基线：指在PCR扩增反应的最初的几个循环里，荧光信号变化不大。接近一条直线，该直线叫做基线。这个了解即可，对实验操作没什么影响。阈值线：一般来说，前15个循环的荧光信号作为异常曲线1:PCR扩增抑制原因分析：H07存在扩增抑制解决方案：将样本稀释后进行扩增(抑制物的影响可通过稀释样本消除) 异常曲线2:自动基线设置问题原因分析：自动基线问题解决方

扩增曲线，是描述PCR动态进程的曲线即扩增曲线PCR的扩增曲线实际上并不是一条标准的指数曲线，而是S形曲线。这是因为随着PCR循环数的增加，DNA聚合酶的失活、dNTP和引物的枯竭、反应副PCR,是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称，是一种体外模拟天然DNA/RNA复制的核酸扩增技术，它利用变性-退火-延伸三个基本步骤，重复一定的循环次

如果扩增效率一致，不同Ct的曲线显示出来就基本是平行的位移，其倾斜程度基本一致。而如下图一样，一条比较“陡”，另一条比较“平”，那么意味着扩增效率不一致。1 pcr正常扩增曲线随着实验的进行，扩增产物不断累积，相应的荧光信号也不断在增加，每进行一个循环就采集一次荧光的信号，经过一定的循环数后(比如40个循环),就可以得到下面的扩增曲

一、正常状态扩增曲线正常PCR扩增曲线呈“S”型，分为基线期、指数期、平台期。扩增曲线良好的指标是曲线拐点清楚，扩增曲线整体平行性好，基线平而无上扬现象3.1行业：pcr实验室借疫情兴起，带动行情继续快速发展分子诊断是体外诊断的另一个规模较大的细分领域，主要通过检测受检个体或其携带的病毒，病原体的遗传物质来为疾病的预防，诊疗提供信息，广泛