PCR扩增有多个条带,pcr扩增循环次数是不是越多越好

PCR电泳边缘条带 2023-10-13 22:15 328 墨鱼

PCR电泳边缘条带

PCR扩增有多个条带,pcr扩增循环次数是不是越多越好

因为一般情况下引物二聚体的条带都是或多或少的存在的。如果是目的条带有两条，那么可能是引物出现了错配，也有可能是本身就有两种可能。回收测序即可。追问：两条扩增产物出现多条带(杂带) 1) 引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。2) 循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。3) 酶

∪﹏∪ 非特异性扩增优化下pcr条件在不行的话就重新设计引物阅读全文提取total RNA 跑胶为什么只有3条带三条是主带哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和小RNA,4、低特异性扩增：可能存在非特异性扩增或引物二聚体形成。可以尝试优化PCR反应条件，如调整引物浓度、

PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引问题2:非特异性扩增现象：条带与预计的大小不一致或者非特异性扩增带原因：1.引物特异性差2.模板或引物浓度过高3.酶量过多4.Mg2+浓度偏高5.退火温度偏低6.循环次数过多对策：1.重新设计引物

总DNA本身就是不均一的，怎么能看出条带？上很多样也是一大片拖尾样，没有条带。PCR产物大小均一，当然会很亮。扩增产物出现多条带(杂带): 1、引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。2、循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。3、

出现多条条带表示PCR反应的特异性不高，可以进行如下优化尝试：1.适当提高PCR的退火温度。退火温度越高，DNA分子之间的配对越困难。这样可以减少引物与模板之间PCR反应扩增产物出现多条带原因：(1)引物用量偏大，引物的特异性不高。应调换引物或降低引物的使用量。2)循环的次数过多。适当增加模板的量，减少循环次数。3)酶的用

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