qpcr复孔cq值差异一般是多少,pcr的基本原理

qpcr复孔cq值差异一般是多少,pcr的基本原理

如果一致，要看两者Cq相差多少，比如，针对某一种引物的实验样品Cq值为28. 5,阴性对照的Cq值为33. 6,由于Cq值相差大于5,如果按95%的扩增效率计算，两者模板量相差28倍之多，对分析数据影Q：qpcr 的3 个复孔，其中一个cq 值和另外两个相比>0.5 但是<1 的孔可以纳入计算吗。A1：

∪△∪ 正常值范围是20-35吧，如果实在不行，预实验可以设置两个复孔，复孔间差值不要超过0.5 申东熙老伯2022-07-06 有帮助QPCR的CT值在15-30之间都可能，设置两个复孔也可以，主要看你P什么东一般建议，阳性结果(科研)调整到15-30之间，阴性对照Ct>35,内参基因一般小于20,且样品间内参的Ct值差不超过1,表明内参基因表达量稳定，复孔Ct值标准偏差不超过0.5。

目前正做qpcr,引物特异性没有问题，目前就是副孔，重复ct值相差太大，相求助战友们就我而言，我现在复孔间重复性差一般会有以下两种情况：(1)CT值很大，如CT≥30,重复性差属于正常现象。该现象符合泊松分布，即在有效模板量很少的情况下，模板与引物的碰撞存在随

指多个复孔Cq值之间的接近程度，且重复孔之间的标准偏差不大于0.2,说明实验的重复性较好。▲图2. 96孔重复的扩增曲线，Cq Mean=19.1,CV=0.002 图源：Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统不同大鼠的GAPDH ct值差别较大，请问您是怎么处理的？2017-08-21来自iOSIP辽宁辽宁收藏回复点赞

qPCR复孔的Ct值差异稍大，大概在2左右生物是垃圾楼主发布于2020-06-17IP 江苏这个帖子发布于3 年零102 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。但是我溶解曲线很正常，Qpcr(1) 一、评价数据CT值计算要求15~35,最少2个复孔，且复孔差异不能过大，SD< 0.05。Tm值尽量相同且单一，表示扩增特异性好。扩增曲线，好的扩增曲线成“S”型，如下图，还可观察复