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荧光定量pcr溶解曲线图分析 |
pcr溶解曲线分析,pcr溶解曲线两个峰
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怎么通过Q-PCR的扩增曲线和溶解曲线来分析结果1、扩增曲线(如果做双ΔCT法): (1)扩增曲线必须是S型,有明显的四个时期,且复孔的CT值尽量一致,相差不要超过0.5个《完整版)RealtimePCR溶解曲线分析》由会员分享,可在线阅读,更多相关《完整版)RealtimePCR溶解曲线分析(5页珍藏版)》请在人人文库网上搜索。1、首先我们得来说说染料法SYBR Gree
问题分析:PCR产物目的序列中GC含量不均一造成的同一产物解离稍有偏差造成,虽然扩增产物特异,但融解曲线出现非单一峰的现象。解决方法:电泳进行确认是否为大小正确的单一条带。2(完整版)RealtimePCR溶解曲线分析首先我们得来说说染料法SYBR Green的原理,SYBR Green能够结合在双链DNA上面的荧光染料,只有结合了双链DNA,才会发荧光,而游离的不会发光。图
熔解曲线(Dissociation curve):随温度升高DNA的双螺旋结构降解程度的曲线。总的DNA双螺旋结构降解一半的温度称为熔解温度(Tm),不同序列的DNA,Tm值不同。DN很可能是dimer,而不是你的目的产物。如果你相同样品各管的溶解曲线都只有一个尖锐的峰,而且不是dimer,说明你的扩增的产物是稳定正确的,数据可以采用。它只是反
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