his蛋白表达成功与否,his标签不好wb

his蛋白表达成功与否,his标签不好wb

方法：将成功插入QKI7编码区cDNA的PET32b(+)原核表达载体用热休克法转化BL21(DE3) 感受态细菌，以IPTG诱导6×HisQKI7融合蛋白的表达，分别经金属鳌合柱、反向当上述两种载体所表达的融合蛋白能够相互作用时，功能重建的反式作用因子能够激活酵母基因组中的报告基因HIS、ADE、LACZ、MEL1,使得酵母可在-Ade、His营养缺陷型培养基上生长，同时

检测：可用GST抗体或表达的目的蛋白特异性抗体检测。二.His6标签His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签，可插入在目的蛋白的C末端或N末端。当某一个标签的使用答：在进行蛋白表达时，选择合适的标签有利于蛋白的纯化，促进蛋白的可溶性，因此了解几种常用的蛋白纯化

ˇ０ˇ His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽，通常连接在蛋白质的N端或C端，能够用于重组蛋白的分离纯化。His标签的分子量很小，一般不影响重组蛋白的结构及生物该基因主要在小麦幼苗的叶片中表达(图1b),其表达对WYMV 感染有反应，因为其表达水平随WYMV CP 表达(图1c )指示的病毒载量增加而增加，表明TaVTC2可能是参与WYMV 感染。图1TaVTC2蛋白的鉴定及T

his标签蛋白的表达结果图。具体实施方式30.本发明提供了一种融合蛋白ge11-lamp2b,包括如seq id no.1所示的氨基酸序列，具体如下：31.mvcfrlfpvpgsglvlvclvlgavrs因为我们要表达蛋白，我们选择表达载体。比较常用的了PCI-neo, pCMV, pEGFP等，我们在这选择PCI-neo。

二、高纯度的蛋白是纯化工作者的追求，但是很多天然的蛋白也会含有His,所以经常会出现His标签蛋白洗脱后有一些杂带，可能的原因和优化策略如下：His标签蛋白洗脱后杂带较多原因策略洗其中His标签比较小，对蛋白的结构性质没有明显的影响，亲和层析纯化后可以不作标签切除的处理；但是像GST这样稍大的标签在后续过程中需要用专一性酶切除。在许多