荧光pcr曲线基线波动,荧光定量pcr溶解曲线没有峰

荧光pcr曲线基线波动,荧光定量pcr溶解曲线没有峰

原因：①柱温波动。即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。②流动相不均匀。二是仪器本身的问题，可能在扩增过程中仪器出现了波动或者本身该检测孔出现了异常。2)扩增曲线断裂或下滑比较典型的曲线下滑如上图所示，主要原因是模板浓度太

原因分析：(1)软件在进行基线自动扣除的时候出现错误，引起了扩增曲线抬升。2)选用的耗材、试剂或者操作的原因导致背景荧光信号有所波动，造成反应孔的自动基线扣除错误。3)探针浓本发明所述消除pcr荧光基线期波动的方法，按照下述步骤进行：步骤1,在实时荧光定量pcr反应中，采集荧光信号数据集，所述数据集包含多个数据点；将每个所述数据点与设定的顺序号一一对应，

分析其原因是：气泡在PCR 反应的过程中被加热，在某个时刻破裂，此时出现荧光扰动，在这个循环检测到的荧光型号和上一个循环不一样，此时如果波动位于基线期很可能就被软件识别为开始扩增的拐点，扩增二是仪器本身的问题，可能在扩增过程中仪器出现了波动或者本身该检测孔出现了异常。2)扩增曲线断裂或下滑比较典型的曲线下滑如上图所示，主要原因是模板浓度太高了，在基线期内就起

o(╯□╰)o 正常PCR扩增曲线呈“S”型，分为基线期、指数期、平台期。扩增曲线良好的指标是曲线拐点清楚，扩增曲线整体平⾏性好，基线平⽽⽆上扬现象。理论上，PCR每个循环后扩增产物量出现这种情况可以采取手动调整基线的方法，重新定义基线即可正常，即将基线起点改为荧光信号稳定的循环数(一般是3),基线终点要改成扩增曲线起峰的前一个循环数(比如起峰是在第25个循

?０? 手动设置基线。将Baseline End设置为“扩增信号出现的前一个循环”即原始为26,将其设置为20,点击OK即可恢复正常曲线。异常曲线3:荧光定量PCR实验结果中无Ct值出现原因分析：(1)PC解决方案：手动设置基线。将baseline end 设置为「扩增信号出现的前一个循环」即，图片展原始为26,将其设置为20,点击ok 即可恢复正常曲线。异常曲线3:荧