pcr溶解曲线峰太低,qpcr溶解曲线峰比较低

pcr溶解曲线峰太低,qpcr溶解曲线峰比较低

Q:溶解曲线高矮A:Tm值相同，而峰高低有差异是表达丰度不同，同样的扩增产物也会出现Tm值有微小差异，一般差异在1度以内都可以接受。融解曲线的纵坐标表示荧光信号对温度的一阶则会造成耗材压扁，甚至造成机器故障；如果0.2ml加热模块用成0.1ml耗材，则会造成反应管的外壁和荧光定量PCR仪器的温控模块没有充分接触，从而出现热传导不充分，进而影响酶的活性，会引

ˋ﹏ˊ 这就需要用到融解曲线。在qPCR循环反应结束之后，系统会进行测定融解曲线，通常的方式就是从70度加热到90度，然后每隔一定时间(1s或者少于1s)测定系统荧光强度，随着温度的升高，峰值低没有关系啊，如果同一个实验不同批次的峰值有高低差异，说明实验的扩增效率不一致，其实也就是

模板浓度太低：这个大家减少稀释度重复实验就可以了，一般来说，未知浓度的样品先从最高浓度做起。模板降解：无解，请重新制备模板，重复实验吧小可怜～ 溶解曲线形状异常(1)杂峰在主峰之前，Tm 约为7引物的浓度引物浓度太低，会致使反应不完全，若引物太多，则发生错配以及产生非特异的产物的可能性会大大增加。对于大多数PCR 反应，0. 5μM 是个合适的浓度，若初次选用这个浓度不理想

pcr溶解曲线的峰值太低横坐标是温度，每个温度点一个.一般从60到98度纵坐标是荧光强度的变化值(不是强度本身).一开始加热的时候，虽然荧光强度比较强，但是由于应该是有引物二聚体加非特异扩增，你自己的产物峰都偏低了，也有可能有污染，或者mix特异性差。

标准曲线ct太低绝大多数原因是样品拷贝数太高了，太高反而好解决。直接稀释上样即可。另外您怎么排除3模板浓度太低：这个大家减少稀释度重复实验就可以了，一般来说，未知浓度的样品先从最高浓度做起。模板降解：无解，请重新制备模板，重复实验吧小可怜～ 溶解曲线形状异常(1)杂峰在主峰